Étude de la régulation de l'épissage alternatif induit par le cisplatine à partir d'un exemple clé, l'enzyme mitochondriale CoASy
Lemaitre, Florence
Promotor(s) : Habraken, Yvette
Date of defense : 5-Sep-2019 • Permalink : http://hdl.handle.net/2268.2/7439
Details
Title : | Étude de la régulation de l'épissage alternatif induit par le cisplatine à partir d'un exemple clé, l'enzyme mitochondriale CoASy |
Author : | Lemaitre, Florence |
Date of defense : | 5-Sep-2019 |
Advisor(s) : | Habraken, Yvette |
Committee's member(s) : | Struman, Ingrid
Lambert, Charles Dequiedt, Franck |
Language : | French |
Keywords : | [fr] épissage alternatif , c-Jun, cisplatine, résistance, mitochondries, CoASy |
Discipline(s) : | Life sciences > Biochemistry, biophysics & molecular biology |
Institution(s) : | Université de Liège, Liège, Belgique |
Degree: | Master en biochimie et biologie moléculaire et cellulaire, à finalité approfondie |
Faculty: | Master thesis of the Faculté des Sciences |
Abstract
[fr] Les lésions de l’ADN des cellules cancéreuses engendrées par les agents génotoxiques, comme le cisplatine, au cours des traitements chimiothérapeutiques affectent la transcription et l’épissage de nombreux gènes influençant ainsi l’efficacité du traitement. Durant ce projet de mémoire, nous nous sommes uniquement focalisés sur la régulation des évènements d’épissage et, en particulier sur l’épissage alternatif dépendant du cisplatine du transcrit de CoASy codant pour une enzyme mitochondriale intervenant dans les deux dernières étapes de la biosynthèse de novo du coenzyme A. Le variant d’épissage de Coasy étudié ici, appelé Coasy ∆E4-5, a perdu les exons cassettes 4 et 5 encodant le site de liaison de l’ATP nécessaire à l’activité enzymatique de CoASy. De ce fait, nous avons investigué, en plus des acteurs impliqués dans la régulation des évènements d’épissage dus au cisplatine, la fonctionnalité de la petite isoforme par rapport à la réponse au traitement chimiothérapeutique.
La déplétion de c-Jun et des facteurs d’épissage RBM39 et RBFOX2 en MCF-7 bouleversait le destin des exons en présence de cisplatine. La déplétion indépendante de c-Jun et RBFOX2 réduit le saut d’exon induit par le cisplatine alors que la déplétion de RBM39 mine et amplifie la réponse au cisplatine. Une interaction entre c-Jun et RBM39 ayant été démontrée préalablement, l’interaction entre c-Jun et RBFOX2 a été recherchée par des essais de complémentation en protéine et par immunoprécipitation dans ce travail. Les résultats de ces essais indiquent l’existence d’une interaction directe entre ces deux protéines. En présence de cisplatine, cette interaction est caractérisée par une augmentation de l’affinité et une indépendance de la phosphorylation de c-Jun par les JNK qui restent à confirmer. Sur base de ces interactions et de la présence de sites de liaison de RBFOX2 et RBM39 au niveau des introns 3 et 4, nous avons proposé un modèle du mécanisme moléculaire de régulation de l’épissage alternatif médiée par le cisplatine pour le transcrit de CoASy où c-Jun initierait l’action de RBFOX2 et inhiberait RBM39. Ainsi, nous offrons une nouvelle vue des fonctions d’épissage de c-Jun. D’autre part, nous avons aussi montré l’importance de CoASy ∆E4-5 dans la dynamique mitochondriale, la survie et la prolifération cellulaires.
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