Génération et caractérisation de modèles de poisson zèbre pour l'étude de l'adénocarcinome canalaire pancréatique

Abstract

Le cancer du pancréas et plus particulièrement l’adénocarcinome ductal pancréatique (PDAC) est en augmentation constante dans les pays développés et étant donné l’absence de traitement adéquat, il reste un des cancers dont le taux de survie est le plus faible (< 5 % à 5 ans). L’élément initiateur est l’acquisition d’une mutation dans l’oncogène Kras. La progression tumorale va se poursuivre par l’acquisition d’autres mutations qui vont amener les cellules dans différentes voies aboutissant in fine aux différents sous-types de PDAC. Ces différents sous-types ont des caractéristiques différentes et notamment la dépendance ou non à Kras pour la survie de la tumeur. L’enjeu actuel est de définir quels sont, dans ces différents sous-types, les facteurs essentiels du processus de cancérogenèse.

Dans ce but, notre laboratoire utilise le zebrafish comme modèle de tumeurs humaines. Le zebrafish a créé sa propre niche dans la recherche contre le cancer, en complément des modèles existants en raison de ses avantages spécifiques. Par exemple, la croissance tumorale chez des poissons « casper » complètement transparents peut être suivie sur l’animal vivant, ce qui facilite notamment la détection de métastases. De plus, comparer le développement tumoral dans des organismes éloignés que sont le zebrafish et l’homme permet de mettre en évidence les éléments conservés à travers l’évolution et donc essentiels pour le processus de cancérisation.

En générant des lignées de poisson zèbre transgénique surexprimant l’oncogène KrasG12D dans les cellules pancréatiques, notre laboratoire a réussi à développer un modèle de PDAC. Le but de ce mémoire est de caractériser de façon exhaustive les différentes étapes du processus. Pour cela, nous avons réalisé des expériences d’histologie (colorations à l'hématoxyline et à l'éosine (HE), à l’alcian blue et au trichome). Ces analyses ont été affinées par des expériences d’immunohistochimie en utilisant différents anticorps. Ces analyses ont pu montrer que le PDAC généré récapitule assez fidèlement le processus humain.