Caractérisation de la Réponse Régénérative des cellules bêta pancréatiques du Zebrafish

Abstract

Le diabète est une maladie caractérisée par une hyperglycémie chronique. Il se développe lors d’un dysfonctionnement de la fonction endocrine du pancréas. Le traitement de premier choix consiste en des injections quotidiennes d’insuline exogène. Néanmoins la recherche se porte sur d’autres perspectives thérapeutiques, notamment la régénération des cellules β pancréatiques à partir des progéniteurs canalaires. La source de régénération cellulaires chez les mammifères restent controversée due à leur capacité de régénération limitée. Le laboratoire utilise le poisson-zèbre comme modèle animal. En effet il possède la capacité de régénérer ses cellules β après leur ablation. De plus l’origine canalaire des cellules β régénérées est clairement établie chez ce modèle. Il a été récemment montré au laboratoire que les voies de signalisations de la Calcineurine et de p53 étaient impliqués dans le processus de régénération des cellules β à partir de progéniteurs canalaires. Les objectifs de ce mémoire étaient d’étudier l’effet de la modulation des voies Calcineurine et p53 dans la régénération canalaire précoce et des cellules β à des stades plus tardifs. Notre étude sur l’influence de Calcineurine sur la prolifération des cellules canalaires a permis de montrer que son inhibition entraîne une augmentation de celle-ci pendant les stades précoces de la réponse régénérative. Nous avons émis l’hypothèse que Calcineurine réprime leur prolifération pendant les stades précoces. De plus nous avons mis au point un protocole d’IHC fluorescente afin de pouvoir étudier la prolifération des cellules canalaires en utilisant d’autres marqueurs de cycle cellulaire comme PCNA. Nous avons également étudier l’effet de la modulation de la voie Calcineurine sur la réponse régénérative canalaires à des stades plus tardifs en utilisant un outil transgénique permettant sa surexpression. Nos résultats ont montré que son activation abolit la réponse régénérative canalaire à des stades plus tardifs. Nous avons également étudié l’effet de l’inhibition de Calcineurine sur d’autres cellules endocrines comme les cellules α. Nous avons observé que l’inhibition de Calcineurine par cyclosporine A n’a pas d’effet sur la réponse régénérative de ces cellules. Outre Calcineurine, l’autre voie candidate dans le cycle cellulaire, p53 a été étudiée. Il avait été démontré précédemment au laboratoire l’effet de l’inhibition de p53 sur la formation des cellules β. Nous avons alors confirmé que son inhibition entraîne la perte de la réponse régénérative des cellules β. Ces résutats ont confirmé le rôle de Calcineurine dans la réponse régénérative canalaire des cellules. Les recherches futures utiliseront d'autres marqueurs de cycles cellulaires afin de valider nos données et d'étudier plus en profondeur les autres cellules endocrines.