Etude de micro-RNAs exosomaux altérés dans la sclérodermie systémique avec atteinte pulmonaire

Abstract

La sclérodermie systémique (SSc) est une maladie auto-immune complexe caractérisée par un dysfonctionnement du système immunitaire, une vasculopathie, une inflammation cellulaire et une fibrose de la peau et de plusieurs organes internes. Lorsque les poumons sont atteints, on parle de sclérodermie systémique avec atteinte pulmonaire interstitielle (SSc-ILD). L’atteinte pulmonaire (ILD) est la principale cause de mortalité chez les patients SSc, représentant 30 à 35% des décès dans ce groupe. Actuellement, le défi est de diagnostiquer spécifiquement et le plus rapidement possible l’atteinte pulmonaire afin de garantir un meilleur suivi des patients. Dès lors, la recherche de nouveaux biomarqueurs spécifiques de l’atteinte pulmonaire chez les patients SSc est cruciale. Depuis quelques décennies, les vésicules extracellulaires, notamment les exosomes, suscitent un intérêt croissant dans l’identification de biomarqueurs de différentes pathologies. Une étude menée récemment dans le laboratoire a permis l’identification de microRNAs (miRNAs) enrichis dans les exosomes de patients SSc-ILD (miR-584-5p, miR-744-5p et miR-1307-3p). L’objectif de mon mémoire a été d’étudier les propriétés fonctionnelles des exosomes/miRNAs exosomaux associés à la SSc-ILD. Pour cela, nous avons isolé des exosomes par ultracentrifugation à partir du plasma de patients SSc-ILD (n=22), sans ILD (SSc-no ILD, n=23) et de sujets sains (n=23). Tout d’abord, nous avons étudié l’impact des exosomes de patients SSc-ILD sur l’expression de miRNAs dans les fibroblastes pulmonaires. Nos résultats montrent que les exosomes de patients SSc-ILD sont capables de transférer les miRNAs, miR-584-5p et miR-744-5p, dans les fibroblastes pulmonaires. Une analyse in silico a révélé que ces miRNAs ciblent les processus cellulaires associés à la physiopathologie de la SSc-ILD, tels que l'apoptose et la sénescence cellulaire. Ensuite, l’étude fonctionnelle de ces deux miRNAs associés à la SSc-ILD démontre la propriété profibrotique de miRNA-584-5p. Enfin, nous avons étudié l'impact des exosomes sur la progression de la fibrose pulmonaire chez les patients atteints de SSc. Les exosomes de patients SSc présentent des propriétés profibrotiques caractéristiques de la progression de la maladie. En effet, les exosomes de patients SSc-ILD présentent des propriétés profibrotiques plus élevées que ceux de patients SSc sans ILD et de sujets sains. L'inhibition de miR-584-5p avant le traitement avec les exosomes SSc-ILD diminue l’effet profibrotique de ces vésicules, ce qui montre que miR-584-5p contribue aux propriétés profibrotiques des exosomes SSc-ILD. En conclusion, les propriétés profibrotiques des exosomes SSc-ILD suggèrent un rôle majeur de ces vésicules sur l’apparition et la progression de l’atteinte pulmonaire chez les patients SSc. Ces propriétés seraient en partie dues au transfert de miR-584-5p dans les cellules cibles.