Le potentiel thérapeutique du miARN-505-5p et son mécanisme moléculaire dans le contexte de l'ostéosarcome

Abstract

L'ostéosarcome est le cancer le plus fréquent chez les adolescents et les jeunes adultes. Le traitement conventionnel actuel repose sur une combinaison de chimiothérapie et de chirurgie. Mais ces traitements très agressifs entraînent de nombreux effets secondaires à long terme, tant physiques que mentaux. Il est donc impératif de développer de nouveaux traitements moins invasifs. Les vésicules extracellulaires, en particulier les exosomes, sont de plus en plus étudiées en tant que vecteurs pour l'administration de médicaments. Elles sont bien tolérées par l'organisme et peuvent délivrer des médicaments potentiels tels que les microARN. Nous nous intéressons au microARN miR-505-5p en tant que traitement de l'ostéosarcome. Les miARN sont de courts ARN non codants et sont utilisés par la cellule pour réduire les gènes au silence. Leur principal mécanisme est l'inhibition de la traduction en se liant à un ARNm cible. miR-505 a été décrit comme un suppresseur de tumeur, et ce projet s'intéresse donc à son potentiel thérapeutique, mais aussi à son mécanisme moléculaire. Des travaux antérieurs du laboratoire ont montré que le miR-505 encapsulé dans des exosomes de cellules souches adipeuses (ASC) présentait des propriétés antitumorales sur des cellules d'ostéosarcome. Les principaux objectifs de ce travail sont donc de confirmer le potentiel suppresseur de tumeur du miR-505-5p ainsi que de déterminer son mécanisme moléculaire en analysant l'interaction entre le miRNA et ses cibles potentielles. Nos résultats ont montré que la transfection de cellules d'ostéosarcome, U2OS et 143B, avec un mimic du microARN miR-505-5p diminue leur prolifération, leur capacité invasive et clonale. Nous avons ensuite réalisé les mêmes tests fonctionnels avec des exosomes chargés en miR 505-5p. L'ensemble de ces résultats montre un effet antitumoral de ces exosomes cargo sur les cellules d'ostéosarcome. L'efficacité du miR-505 semble cependant plus faible lorsqu'il est incorporé dans les exosomes que lorsqu'il est transfecté. Enfin, nous avons pu démontrer que le miR-505-5p exerce la répression de l'expression d'au moins 5 gènes directement impliqués dans la prolifération et l'invasion tumorale : LAMP1, AKTS1, KIF3B et RhoC et BanF1. Nous avons ensuite cloné la région 3'UTR de trois d'entre eux, les gènes AKTS1, BANF1 et RHOC, et ainsi montré, à l'aide de systèmes rapporteurs, qu'ils sont des cibles directes du microARN. En conclusion, nous avons démontré dans ce travail que le miR-505-5p