Activation stérile des cellules T non-conventionnelles, invariant Natural Killer T cells (iNKT), par des macrophages cultivés dans un milieu enrichi en lipides

Abstract

Les lipides et particulièrement les acides gras sont des macromolécules essentielles au développement et à l’homéostasie d’un individu. Leur intérêt en recherche n’a pas cessé de croître. Une des raisons de cet engouement réside notamment dans le rôle primordial qu’ils jouent dans la régulation de nombreuses voies métaboliques. Un sujet d’étude important lie les acides gras et l’obésité. Effectivement, l’obésité est connue pour induire chez près de 70% des personnes obèses une dyslipidémie modifiant notamment le taux d’acides gras libres dans le sang et les tissus. L’environnement riche en lipides issu de l’obésité a pour conséquence de perturber certaines cellules immunes comme les « invariant Natural Killer T-cells » (iNKT). Celles-ci sont des cellules T non-conventionnelles qui ont la particularité de reconnaitre via leur TCR des antigènes lipidiques présentés par le CD1d sur des cellules présentatrices d’antigènes (CPA). Cette activation conduit à la libération rapide de quantités importantes de cytokines. Elles jouent un rôle aussi bien dans l’homéostasie de certains tissus que dans l’immuno-surveillance d’infections microbiennes et de tumeurs. Mon laboratoire d’accueil a démontré une hausse de l’apoptose des cellules iNKT du sang périphérique chez les patients obèses. Les cellules iNKT restantes ont un profil activé et montrant une diminution de l’expression de leur TCR suggérant qu’elles sont chroniquement activées par la présentation d’antigènes lipidiques via le CD1d de CPAs. Ces résultats nous permettent de penser qu’il existe un lien entre l’augmentation du taux de lipides dans le sang des patients obèses et l’activation chronique ainsi que la mort des cellules iNKT chez ces personnes. Les objectifs ont été de confirmer que les macrophages traités avec les acides gras saturés leur confèrent la capacité d’activer les cellules iNKT et d’entamer une étude des mécanismes sous-jacents. Nous avons d’abord confirmé l’activation des cellules iNKT après leur coculture avec des macrophages traités par une augmentation de la production d’IFN-γ dans les milieux de coculture et de l’expression du marqueur d’activation CD25 ainsi qu’une diminution de la présence du TCR à la membrane. La suite a été de déterminer l’importance du CD1d et l’implication de deux voies de la réponse au stress du réticulum endoplasmique au sein des macrophages traités dans l’activation indirecte des cellules iNKT. L’absence d’activation des cellules iNKT cultivées dans les milieux conditionnés des macrophages traités nous a permis de valider que les contacts cellulaires entre macrophages et cellules iNKT sont essentiels à l’activation de ces dernières, éliminant la possibilité que leur action ne dépende que de facteurs solubles comme des cytokines. L’utilisation d’anticorps bloquant le CD1d nous a permis de suggérer que le CD1d participe à cette activation en présentant des antigènes lipidiques aux cellules iNKT. Finalement, des résultats préliminaires utilisant des inhibiteurs d’IRE1 et de PERK ont été générés permettant de penser que la voie d’IRE1 ne serait pas impliquée dans l’activation indirecte des cellules iNKT par des macrophages traités aux acides gras saturés tandis que la voie de PERK le serait.