Thesis, COLLÉGIALITÉ, FRANZEN Rachelle

Abstract

La leucémie myéloïde aiguë (AML) est une hémopathie maligne du sang touchant majoritairement les personnes âgées. Malgré une thérapie intensive basée sur une chimiothérapie à base de cytarabine (AraC) et de greoe allogénique de cellules souches, les taux de rechute peuvent atteindre 60%. Ces rechutes peuvent être dues à des mécanismes d’évasion immunitaires mis en œuvre par les cellules leucémiques. L’expression de molécules de point de rencontre immunitaire (molécules de checkpoint immunitaires - ICM) pourraient faire partie de ces mécanismes. Le but de ce mémoire est de mettre au point une approche expérimentale permettant d’identifier ces ICMs. Cette approche est basée sur des cocultures de cellules d’AML et T pré-activées et la mesure de la capacité des cellules d’AML à survivre dans ce système. Une première série d’expériences a permis de montrer la faisabilité de ce système. En eoet, les lymphocytes T pré-activés exercent bien une activité cytotoxique sur les cellules d’AML lorsqu’ils sont cocultivés ensemble. L’activation des lymphocytes T était aussi inhibée après coculture ; reflétant une activité immunosuppressive par les cellules cancéreuses. Enfin, des expériences avec des transwells ont montré que le contact cellulaire est important pour l’action cytotoxique des lymphocytes T envers les AML.Nous avons ensuite testé la reproductibilité de notre modèle. Pour ce faire, nous avons répété les cocultures avec des lymphocytes T issus de trois donneurs dioérents, sur de multiples lignées d’AML. Ceci a montré que la variabilité entre les dioérents donneurs était faible. Cela démontre la reproductibilité de notre modèle et de notre approche expérimentale. Enfin, nous avons eoectué des comparaisons de la résistance à la cytolyse entre plusieurs lignées d’AML, pré-traitées ou non avec de la cytarabine. Ceci a mis en évidence une résistance variable d’une lignée à l’autre, suggérant que certaines pourraient exprimer plus d’ICMs que d’autres. Cela a également montré que les cellules traitées à l’AraC tendent à avoir une plus grande résistance aux lymphocytes T, renforçant l’hypothèse que l’expression d’ICMs par ces cellules peut contribuer au phénomène de rechute chez les patients. Ce mémoire représente la fondation d’un projet visant à identifier de nouvelles ICMs, via des séquençages d’ARN des cellules d’AML cocultivées ou non avec des lymphocytes T. Les ICMs découvertes pourraient représenter de nouvelles cibles thérapeutiques pour prévenir la rechute de l’AML.