Étude des mécanismes d'interaction entre les vésicules dérivées des mitochondries et les endosomes précoces

Abstract

L’angiogenèse est un processus finement régulé, essentiel au développement et impliqué dans de nombreuses pathologies. Elle est notamment stimulée par la signalisation du VEGF au niveau des endosomes précoces (EP). Notre laboratoire a mis en évidence que, outre l’activation de cette voie, le VEGF induit également la production de vésicules dérivées des mitochondries (MDVs). Celles-ci apportent Rab5 aux EP, favorisant ainsi leur maturation et atténuant la signalisation VEGF. Mon projet explore le lien entre les MDV et les endosomes. Des analyses par spectrométrie de masse ont révélé la présence de protéines communes aux deux organites, notamment VDAC1, une protéine de la membrane externe mitochondriale. Nous avons émis l’hypothèse que VDAC1 pourrait intervenir dans l’interaction entre MDVs et endosomes. Des expériences d’immunofluorescence ont confirmé que la diminution d’expression de VDAC1 réduit leur colocalisation. Sur le plan fonctionnel, cette inhibition accroît la migration, la prolifération et la perméabilité des cellules endothéliales, trois paramètres clés de l’angiogenèse. Pour comprendre comment VDAC1 établit ce lien, nous avons utilisé l’approche de marquage de proximité TurboID afin d’identifier ses partenaires d’interaction. Dans un premier temps, avons généré des lignées HEK293 exprimant VDAC1-TurboID, en vue d’une analyse protéomique sur endosomes purifiés. Enfin, nous avons validé la localisation et l’activité de biotinylation de la construction dans les cellules. Ensemble, nos résultats suggèrent un rôle inédit de VDAC1 comme relais moléculaire entre mitochondries et endosomes, modulant la maturation endosomale et la signalisation du VEGF. La perturbation de ce lien prolonge la signalisation pro-angiogénique, révélant un nouvel axe mitochondries–endosomes dans le contrôle de l’angiogenèse.