Thesis, FRANZEN Rachelle

Abstract

L’épilepsie myoclonique juvénile (EMJ) est une épilepsie génétique apparaissant à l’adolescence, période caractérisée par la poursuite de la maturation cérébrale et de la myélinisation chez l’Homme. Parmi les gènes associés à cette maladie, CILK1 constitue un candidat d’intérêt en raison de son expression croissante lors de la différenciation des progéniteurs oligodendrocytaires (OPCs) en oligodendrocytes matures. Ce travail visait à déterminer le rôle de CILK1 dans la production et la prolifération des OPCs ainsi qu’à développer des méthodes permettant d’étudier son implication dans l’oligodendrogenèse. L’analyse de souris dépourvues de CILK1 (KO) a montré une diminution généralisée de l’épaisseur corticale, suggérant une altération de la neurogenèse. En revanche, l’oligodendrogenèse corticale apparaît relativement préservée malgré des variations régionales de la densité des cellules Olig2+. Ces résultats ne semblent pas pouvoir être expliqués uniquement par une perturbation de la voie SHH, pourtant essentielle au développement des oligodendrocytes. D’autres voies de signalisation, notamment celles impliquant les facteurs FGF, pourraient être concernées. À l’inverse, une diminution importante des cellules Olig2+ est observée dans l’hippocampe et plusieurs structures associées, indiquant un rôle plus marqué de CILK1 dans ces régions. L’étude du prosencéphale a combiné différentes approches. Les analyses par western blot ont révélé une augmentation de l’expression de Ctip2 et une légère diminution de Nkx2.1, suggérant des altérations du développement de certaines populations neuronales. Aucune modification significative d’Olig2 n’a cependant été détectée par cette méthode. La cytométrie en flux sur noyaux (FANS) a mis en évidence une réduction du nombre de neurones et d’OPCs chez les souris KO, confirmant l’existence de défauts du développement cérébral. Enfin, plusieurs méthodes d’isolement d’OPCs ont été comparées. Le tri cellulaire par FACS s’est révélé le plus performant en termes de pureté et de viabilité. Des protocoles fiables de culture, de prolifération et de différenciation des OPCs ont également été établis. Ces travaux ont par ailleurs montré que certaines cellules Olig2+ correspondent probablement à des astrocytes, soulignant la nécessité d’utiliser des marqueurs complémentaires pour mieux caractériser les populations cellulaires étudiées. En conclusion, notre étude suggère que CILK1 joue un rôle important dans le développement cérébral en modulant la réponse de différentes populations de progéniteurs aux morphogènes, tout en fournissant de nouveaux outils pour approfondir l’étude de son implication dans l’oligodendrogenèse.